اليوم 1 من 30 — أساسيات الميكروبيولوجي والفحوصات المخبرية Day 1 of 30 — Microbiology Basics & Laboratory Testing and Diagnostics

السبت 2026-08-29 · المجال: تحديد الأمراض المعدية (Identification of Infectious Disease Processes) — 22 سؤالًا من 135 (16.3%) · ⏱ 3 ساعات

اللغة / Language:

الفصل Chapter	الصفحات	عدد الصفحات
أساسيات علم الأحياء الدقيقةMicrobiology Basics	957–1013	57
الفحوصات المخبرية والتشخيصLaboratory Testing and Diagnostics	1014–1042	29
الإجمالي		86 صفحة

1) تصنيف الجراثيم وبنيتها Bacterial Classification and Structure

الجراثيم بدائية النواة (Prokaryotic): لا نواة مرئية، ولا غلاف نووي غشائي، ولا عضيات محاطة بغشاء مثل الميتوكوندريا. تحمل جزيء DNA حلقيًا مفردًا، وقد تحمل بلازميدات (Plasmids) تحمل جينات المقاومة.

الاسم العلمي ثنائي: الجنس (Genus) ثم النعت النوعي (specific epithet) — مثل Staphylococcus aureus. يُكتب مائلًا. الجنس يُستخدم وحده، أما النعت النوعي فلا يُستخدم وحده أبدًا — مصيدة اختبارية.

الشكل والترتيب Shape and Arrangement

الشكل	الوصف	مثال
مكورات Cocci	كروية	Staphylococcus عناقيد · Streptococcus سلاسل
عصيات Bacilli	قضيبية	E. coli, Pseudomonas
حلزونية Spiral	ملتوية	Borrelia, Treponema
مزدوجات Diplococci	أزواج	N. meningitidis في السائل الدماغي الشوكي

الأبواغ الداخلية Endospores

عند نفاد المغذيات، تتحول أجناس مثل Clostridium وBacillus إلى أبواغ داخلية (Endospores): تتحمل الماء المُسخّن فوق درجة الغليان، ومقاومة للجفاف وللمواد الكيميائية القاسية، وتنتشر مع الغبار. هذا سبب صعوبة تنظيف المعدات الطبية، وسبب أن المطهر الكحولي لا يكفي مع C. difficile.

التكاثر والتنوع الجيني Reproduction and Genetic Diversity

التكاثر بـالانقسام الثنائي (Binary fission) — نحو 30 دقيقة لجيل واحد في كثير من الأنواع، أي تريليون جرثومة خلال ~20 ساعة لو توفّرت المغذيات. الخلايا البنوية متطابقة وراثيًا، والتنوع يأتي من الطفرات ومن النقل الأفقي للجينات بثلاث طرق يجب حفظها:

الآلية	الوصف
الاقتران Conjugation	نقل DNA (غالبًا بلازميد) عبر تماس مباشر بين خليتين — قد يحدث بين أنواع متباعدة
التنبيغ Transduction	نقل DNA بواسطة عاثية بكتيرية (Bacteriophage)
التحول Transformation	التقاط DNA حر من الوسط المحيط

2) صبغة الغرام The Gram Stain

طوّرها الدنماركي Hans Christian Gram سنة 1884. أهم صبغة تفريقية في المختبر السريري. نتيجتها + شكل الخلية + ترتيبها تحدد: نوع الوسط الزرعي، وإجراءات التعريف، واختبارات الحساسية المطلوبة. وقد توجّه: جودة العينة، والعلاج التجريبي (Empiric)، والحاجة لاحتياطات العزل — مثال: مزدوجات سالبة الغرام في السائل الدماغي الشوكي ⇒ يُشتبه بالمكورات السحائية.

	موجب الغرام Gram-positive	سالب الغرام Gram-negative
الجدار الخلوي	ببتيدوغليكان سميك	ببتيدوغليكان رقيق + طبقة عديد السكاريد الدهني (LPS)
غسل الكحول	لا يزيل مركّب البنفسج البلوري/اليود	يفكك طبقة LPS فيُغسل المركّب خارج الجدار
اللون النهائي	بنفسجي / أزرق داكن	وردي / أحمر (بالصبغة المضادة: السفرانين)

شدة الالتقاط (Avidity): الممرضات المعوية سالبة الغرام تلتقط السفرانين بقوة فتبدو حمراء زاهية؛ الزوائف (Pseudomonas) متوسطة؛ أما العصيات اللاهوائية ورقيقة الجدار مثل Borrelia وLegionella فتُصبغ بضعف وتبدو وردية باهتة.

تُصبغ بضعف بصبغة الغرام وتحتاج صبغات خاصة: Chlamydia وRickettsia وMycobacterium وNocardia. كذلك Mycoplasma لا جدار خلوي لها أصلًا. Stain poorly with Gram stain, require special techniques: Chlamydia, Rickettsia, Mycobacterium, and Nocardia. Mycoplasma has no cell wall at all.

3) الصبغات الأخرى والمجهر Other Stains and Microscopy

الصبغة	الاستخدام / النقطة المميزة
الصامدة للحمض — Ziehl-NeelsenAcid-fast, Ziehl-Neelsen	الأحماض الميكولية طويلة السلسلة تمنع دخول الصبغات القاعدية. يستخدم الحرارة لدفع الصبغة. للمتفطرات.
الصامدة للحمض — KinyounAcid-fast, Kinyoun	إجراء بارد وغير فلوري (يستخدم منظفات بدل الحرارة). يُستخدم أيضًا لـCryptosporidium وCyclospora في البراز.
الأورامين-رودامينAuramine-rhodamine	فلورية — كشف المتفطرات وبعض البوغيات؛ أسرع في المسح.
الكالكوفلور الأبيضCalcofluor white	مسح سريع للفطريات (يرتبط بالكيتين/السليولوز في الجدار الفطري).
حبر الهندIndia ink	محفظة Cryptococcus neoformans في السائل الدماغي الشوكي.
الأكريدين البرتقاليAcridine orange	صبغة فلورية للأحماض النووية — كشف جراثيم قليلة العدد.

أنواع المجاهر Microscope Types

الحقل الساطع (Bright-field): ضوء مرئي — الأكثر استخدامًا؛ العدسة القريبة من العين هي العينية (ocular).
الحقل المظلم (Dark-field): الأجسام تبدو مضيئة على خلفية سوداء — لفحص عينات طازجة مثل اللولبيات (Treponema).
تباين الطور (Phase-contrast): فحص مباشر للخلايا الحية دون صبغ.
الفلوري (Fluorescent): مصدر الطاقة أشعة فوق بنفسجية — للأجسام المضادة المُوسَمة.
الإلكتروني (Electron): مصدر الطاقة حزمة إلكترونات — تكبير هائل لرؤية الفيروسات، لكن مكلف جدًا ولذلك محدود الاستخدام السريري.

4) الأوساط الزرعية وظروف الحضن Culture Media and Incubation

المزرعة النقية (Pure culture) هي مجموعة متحدّرة من خلية واحدة، وتُحصَّل بطبق التخطيط (Streak plate). اختيار الوسط يعتمد على: موقع الزرع، ومتطلبات نمو الممرض المشتبه، واحتمال وجود الفلورا الطبيعية.

فئة الوسط	الوظيفة	المثال في الكتاب
مغذٍّ عامNutrient agar	يدعم نمو طيف واسع	Trypticase soy agar + 5% دم أغنام
إثرائيEnrichment	مغذيات خاصة للجراثيم صعبة النمو (Fastidious)	أغار الشوكولاتة لـNeisseria meningitidis
انتقائيSelective	مواد/مضادات تثبط الفلورا وتسمح للمطلوب	أغار كبريتيت البزموت لعزل Salmonella
تفريقيDifferential	يلوّن مستعمرات كائنات بعينها لتمييزها	أغار الأسيتات للتفريق بين E. coli وShigella

متطلبات الأكسجين Atmospheric Requirements

الفئة	التعريف الدقيق
لاهوائي إجباري Obligate anaerobe	ينمو فقط بغياب الأكسجين الجوي كليًا أو شبه كليًا، ويُثبَّط أو يُقتل بالأكسجين
هوائي Aerobe	يحتاج الأكسجين حاجة مطلقة ولا ينمو بدونه
لاهوائي اختياري Facultative anaerobe	يستخدم الأكسجين إن وُجد، وينمو بدونه — الأوسع انتشارًا سريريًا
محب للأكسجين القليل Microaerophilic	يحتاج أكسجينًا بتركيز 2–10% فقط (مقابل 21% الجوي)، وقد يحتاج CO₂ مرتفعًا

الحضن: معظم المزارع عند 35°م (حرارة الجسم)، بعضها بحرارة الغرفة وبعضها عند 42°م؛ عادة ليلة واحدة، وبعض الجراثيم تحتاج أطول. المتفطرات قد تحتاج أسابيع.

خصائص تعريف المستعمرة: الحجم، القوام (خشن/أملس)، الحافة (متموجة/ريشية)، اللون، وتفاعلها مع الوسط التفريقي (مثل تخمير اللاكتوز)، إضافة إلى تفاعل الصبغات والاختبارات الكيموحيوية السريعة (كاتالاز، أوكسيداز، تخثّر الپلازما Coagulase).

5) الاستعمار مقابل العدوى مقابل التلوث Colonization vs Infection vs Contamination

المصطلح	التعريف الدقيق كما في الكتاب
الفلورا الطبيعية / المتعايشاتNormal flora / Common commensals	كائنات موجودة طبيعيًا على الأسطح السليمة، وتختلف باختلاف موقع الجسم. المتعايش يستفيد دون أن يضر المضيف أو ينفعه.
الاستعمارColonization	وجود الكائن الدقيق بغياب الأعراض وبغياب غزو النسيج العميق. أمثلة: MRSA في المنخرين، N. gonorrhoeae في البلعوم، Salmonella في البراز، الخميرة في السبيل التناسلي.
العدوىInfection	حالة في المضيف ناتجة عن وجود الكائن وغزوه. تُستدل بأحد أمرين: عزل الكائن من موقع معقّم طبيعيًا، أو إحداث استجابة التهابية.
العدوى عديمة الأعراضAsymptomatic infection	كائنات حية في موقع من الجسم بلا أعراض واضحة: السل الكامن، التهاب الكبد B المزمن، الزهري الكامن.
العدوى الانتهازيةOpportunistic infection	عدوى بكائنات تُمرض أساسًا ناقصي المناعة: التهاب سحايا C. neoformans عند نقص المناعة الخلوية، والتهاب رئة Legionella pneumophila عند مرضى الرئة المزمنة ومتلقي الزرع.
التلوثContamination	دخول كائنات إلى العينة أثناء الجمع أو النقل أو المعالجة — لا تمثّل موقع المريض. وهو سبب معتمد لرفض العينة.

الأهم عمليًا: الكائن المستعمِر قد ينقل العدوى للآخرين، وقد يسبب المرض للمستعمَر نفسه عند حدوث خلل: اختلال توازن الفلورا بعد المضادات الحيوية، أو وجود جهاز باضع، أو جرح. ومن هنا: الاستعمار لا يُعالَج، لكنه قد يستوجب احتياطات وقائية.

مصادر الكائنات Sources of Microorganisms

المصدر	التعريف	أمثلة الكتاب
خارجي المنشأExogenous	من خارج المضيف	بشر آخرون (فيروس الحلأ، M. tuberculosis) · أغذية (Salmonella) · مياه ملوثة (Giardia، الفيروسات المعوية) · حشرات (لايم، الملاريا) · حيوانات (البروسيلا، Pasteurella) · هواء (Histoplasma، Legionella)
داخلي المنشأEndogenous	من فلورا المضيف نفسه	S. aureus المحمول على الجلد · E. coli في العجان

أحيانًا لا يكون الفصل حادًا: بعض الممرضات تُكتسب أولًا كمستعمِرة ثم تُمرض لاحقًا — مثل Pneumococcus يُكتسب من مضيف آخر فيستعمر البلعوم ثم يسبب التهاب رئة.

6) جمع العينات ونقلها وشروط الرفض Specimen Collection, Transport, and Rejection

العينة المُختارة أو المجموعة أو المنقولة بشكل خاطئ تُنتج بيانات مضلّلة قد تؤدي لتدبير خاطئ للمريض — ولذلك سوء الجمع والنقل سبب معتمد لرفض العينة. القاعدة: كل العينات تُجمع بتقنية معقّمة وفي حاوية معقّمة، وبعضها يُوضع مباشرة في وسط الزرع (زرع الدم، المزارع التناسلية)، واللاهوائيات تحتاج مناولة خاصة.

الإرشادات الأربعة عشر — أهمها للاختبار Key points from Table 24-3

اجمع من الموقع الذي يُرجَّح وجود العامل المسبب فيه.
اجمع في الوقت الأمثل — مثال الكتاب: بلغم الصباح الباكر للعصيات الصامدة للحمض (AFB).
اجمع المزارع قبل إعطاء المضادات الحيوية كلما أمكن.
اجمع حجمًا كافيًا — الكمية غير الكافية تُعطي نتائج سلبية كاذبة.
قلّل أو امنع تلوث العينة بالفلورا الموضعية لتكون ممثِّلة للموقع المصاب.
استخدم أدوات جمع وأوساط نقل وحاويات معقّمة غير مسرّبة.
عنون العينة بدقة مع الموقع التشريحي المحدد (مثال الكتاب: دم مسحوب من اللمعة الزرقاء للقسطرة المركزية تحت الترقوة اليمنى) — لأن المختبر يختار طريقة المعالجة والوسط بناءً عليه.
إذا كان السحب عبر جلد سليم: نظّف الجلد بـكحول 70% ثم محلول يودي (بوفيدون-أيودين) أو كلورهكسيدين-كحول؛ وإن استُخدم اليود أزل الفائض بعد الجمع.
وجّه المريض بوضوح إن كان سيجمع عينته بنفسه (بول نظيف الالتقاط، براز).
سلّم العينة فورًا — التأخير يُفسدها.

التخزين عند تأخر النقل: بعض العينات تُبرَّد (البول، البراز، البلغم)، وأخرى تُحفظ بحرارة الغرفة. السبب: منع موت الممرضات ومنع فرط نمو المتعايشات. If transport is delayed: some specimens may be refrigerated (urine, stool, sputum), whereas others should be maintained at room temperature — to prevent death of pathogens and/or overgrowth of commensals.

مؤشر جودة البلغم: كثرة الخلايا الظهارية الحرشفية (Squamous epithelial cells) في الفحص المجهري المباشر تدل على أن العينة لعابية من البلعوم الفموي لا من السبيل التنفسي السفلي ⇒ عينة غير ممثِّلة تُرفض ويُطلب بديلها. الصبغة المباشرة إذن أداة لتقييم جودة العينة وليست للتشخيص فقط.

7) زراعة الدم Blood Cultures

لا يجوز بدء مضادات الميكروبات لمريض حرج يُشتبه بعدواه قبل سحب مزارع الدم من موقعين محيطيين منفصلين عبر وخز وريدي عبر الجلد.

النقطة	الرقم / القاعدة
العامل الأهم لحساسية الفحص	حجم الدم المزروع — وليس عدد المواقع وحده
التقييم الأولي لتجرثم الدم	أربع قوارير × 10 مل = مجموعتان (2 sets)
الأطفال	حجم متدرّج حسب الوزن
عند الاشتباه بعدوى القسطرة (CRBSI)	عينتان متزامنتان: واحدة من الجهاز الوعائي وواحدة محيطية. إن تعذّر المحيطي: أكثر من عينتين من لمعات مختلفة.
التشخيص القاطع لـ CRBSI	عزل نفس الكائن من موقع محيطي واحد على الأقل ومن مزرعة طرف القسطرة — أو معايير فرق زمن الإيجابية (DTP)
كلفة مزرعة دم ملوثة واحدة	إطالة الإقامة 1 إلى 5.4 يوم وزيادة الكلفة 4,385 إلى 10,078 دولارًا

مطهر الجلد قبل سحب مزرعة الدم Skin Antisepsis Before Venipuncture

المقبول: صبغة اليود (Tincture of iodine)، أو كحول الأيزوبروبيل، أو الكلورهكسيدين مع الأيزوبروبيل، أو البوفيدون-أيودين مع الكحول الإيثيلي.
غير المفضّل: البوفيدون-أيودين المائي وحده — الدراسات أظهرت انخفاضًا معنويًا في التلوث مع المطهرات الكحولية مقارنة به. وهذه مصيدة اختبارية متكررة.

تفسير المتعايشات في مزرعة الدم: عزل متعايشات شائعة — مثل Corynebacterium أو Bacillus، وCandida أو Malassezia، وأنواع Staphylococcus غير aureus (أي العنقوديات سالبة التخثّر CoNS) — في مزارع دم متعددة يرجّح بقوة وجود عدوى بالجهاز الوعائي. أما عزلها من قارورة/مجموعة واحدة فقط فيرجّح التلوث. Interpreting commensals: recovery of common commensals in multiple blood cultures — Corynebacterium or Bacillus species, Candida or Malassezia species, and Staphylococcus species other than S. aureus — strongly suggests infection of the vascular access device. Growth in only one set suggests contamination.

مزرعة طرف القسطرة: لا توصي CDC ولا INS ولا IDSA بزرع أطراف أو أجزاء القساطر روتينيًا؛ يُزرع الطرف فقط عند الاشتباه بعدوى دم مرتبطة بالقسطرة.

8) الفحوصات المخبرية: الدقة والصحة وضمان الجودة Accuracy, Precision, and Quality

المصطلح	التعريف والمعادلة
الصحةAccuracy	قرب النتيجة من القيمة الحقيقية؛ تُوصف بمصطلحين: الحساسية والنوعية.
الحساسيةSensitivity	قدرة الفحص على كشف كل الحالات الحقيقية = غياب السلبيات الكاذبة. الحساسية = TP ÷ (TP + FN)
النوعيةSpecificity	قدرة الفحص على تحديد النتيجة السلبية بشكل صحيح عند غياب المرض = غياب الإيجابيات الكاذبة. النوعية = TN ÷ (TN + FP)
الدقة / التكراريةPrecision / Repeatability	إعادة الفحص على العينة نفسها تعطي النتيجة نفسها أو قريبة منها. تنبيه: بلا صحة، قد يعيد الفحص إنتاج قيمة خاطئة باستمرار.
اختبار الكفاءةProficiency testing	تقييم خارجي لأداء المختبر: يستقبل عينات عمياء «مجهولة» ويعالجها كعينة مريض، ثم تُقارن نتائجه بإجماع المختبرات المرجعية.

الجهات: تنظيمية — CMS (وفيها برنامج CLIA)، OSHA، CDC، FDA، والجهات الولائية. اعتمادية — The Joint Commission، AABB، CAP. ومطوّرة للمعايير — CLSI.

أغراض الفحوص الثلاثة Purpose of Tests

المسح (Screening): لكشف المرض لدى أشخاص بلا أعراض في مجموعات كبيرة. سمته: حساسية سريرية عالية لكنه يحتاج تأكيدًا بسبب نوعيته المنخفضة.
التأكيد (Confirmation): بعد مسح إيجابي، لضمان صحة النتيجة وتأكيد وجود الحالة — يُختار فحص عالي النوعية.
التشخيص (Diagnosis): لتقييم شخص يُشتبه بإصابته بالمرض.

مثال الكتاب الكامل: فحص RPR مسح للزهري (Treponema pallidum) يكشف أضدادًا غير نوعية، وقد يُعطي إيجابيات كاذبة بسبب التفاعل المتصالب مع: النكاف والحصبة والتهاب الكبد، والسل والبروسيلا والتهاب الشغاف، والتطعيمات، والحمل، والتهاب المفاصل الرثوي. لذلك يُؤكَّد الإيجابي بفحص عالي النوعية: TPHA أو FTA-ABS أو CAPTIA syphilis-G.

9) طرق التشخيص المخبري Diagnostic Methodologies

التشخيص القاطع للأمراض المعدية يتحقق بأربع طرق:

إثبات وجود العامل المعدي: برؤيته مباشرة في العينة (مثل Plasmodium falciparum داخل الكريات الحمر)، أو بكشف مستضداته أو مادته الوراثية (مثل مستضد سطح التهاب الكبد B)، أو باستعادته في مزرعة.
كشف نواتج نوعية ينتجها العامل (مثل ذيفان Clostridium difficile في البراز).
كشف الاستجابة المناعية (تفاعل مستضد-ضد) في مصل المريض (مثل ضد سطح التهاب الكبد B).
كشف العامل بتقنيات تهجين وتضخيم الحمض النووي.

الفحص المباشر Direct Examination

صبغة الغرام: أكثر إجراء يُنفَّذ لفحص العينة السريرية مباشرة بحثًا عن جراثيم أو فطريات.
النسيجي/الخلوي (Histology/Cytology): مفيد لتشخيص عدوى بعوامل يصعب أو يستحيل زرعها — يُرى العامل مباشرة أو يُستدل عليه بالضرر الخلوي المميز. أمثلة: الشعيات، الكلاميديا، الفيروس المضخم للخلايا، الحلأ التناسلي، الجيارديا، الهستوبلازما، الجذام، الورم الحبيبي اللمفي التناسلي، الحصبة.
التحضير الرطب (Wet mount): فحص عينة طازجة. أمثلة: البلغم للعناصر الفطرية، البراز لليرقات والديدان والبيوض والكيسات، السائل الدماغي الشوكي لـCryptococcus neoformans، الإفرازات المهبلية لـTrichomonas vaginalis، رسابة البول للكريات البيض والجراثيم والخمائر. تُضاف كواشف: هيدروكسيد البوتاسيوم 10%، يود لوغول، الكالكوفلور الأبيض، حبر الهند، أزرق الميثيلين لوفلر.

الفحوص الجزيئية Molecular Diagnostic Testing

PCR أول فحص طُوِّر بطريقة تضخيم الحمض النووي وأوسعها استخدامًا. جميع الفحوص الجزيئية معرّضة للإيجابيات الكاذبة لحساسيتها للتلوث من تضخيم سابق أو من عينة أخرى أو من مادة الضبط الإيجابية. إجراءات المنع: تجنّب رذاذ العينات، فتح عينة واحدة في كل مرة، الطرد المركزي النبضي، أنابيب لولبية الغطاء بدل القابسة، تنظيف منطقة العمل بالكلور، واستخدام رؤوس ماصّات بحاجز هوائي.

الطريقة	الخطوات / المبدأ	الميزة أو الحد
مسابر غير مضخَّمةNonamplified probes	مسبار موسوم يرتبط بتسلسل مكمل	حساسية ضعيفة — تحتاج عددًا كبيرًا من الكائنات. أشيع استخدام: تأكيد مزارع المتفطرات بطيئة النمو والفطريات ثنائية الشكل
تضخيم الهدفTarget amplification (PCR)	تمسيخ ← تلدين ← استطالة (Denaturation, annealing, extension)	تتضاعف النواتج نظريًا بعد كل دورة
تضخيم المسبارProbe amplification	تمسيخ ← تلدين ← ربط (Ligation)	الناتج يحوي تسلسلًا موجودًا في المسبار الأصلي فقط
تضخيم الإشارةSignal amplification	لا يزيد تركيز الهدف، بل تركيز جزيئات الوسم	يقلّل الإيجابيات الكاذبة من التلوث المتصالب؛ الإشارة تتناسب طرديًا مع كمية الهدف الأصلية

ميزة جزيئية مهمة: DNA الـC. trachomatis وN. gonorrhoeae يبقى ثابتًا على مسحات جافة لأسبوع؛ ويمكن كشف الحمض النووي بعد بدء العلاج (لأن العلاج يقتل الكائن لكن لا يمحو حمضه النووي فورًا) — وهذا يفسّر لماذا لا يُستخدم الـ NAAT لإثبات الشفاء مبكرًا. لكن الانتقال الكامل للجزيئي في علم الجراثيم محدود بالحاجة لاختبار الحساسية على العزلات.

10) فحوص تقييم العملية المُعدية Tests for the Infectious Process

تحليل السائل الدماغي الشوكي CSF Analysis

أربعة مكوّنات أساسية: اللون والصفاء، البروتين، الغلوكوز، وتعداد الكريات البيض مع التفريق. الطريقة الموصى بها للتعداد التفريقي هي الطرد المركزي الخلوي (Cytocentrifugation).

المكوّن	البالغ الطبيعي	الوليد	العدوى الجرثومية
اللون/الصفاء	رائق عديم اللون	—	عكِر
البروتين (مغ/دل)	15 – 45	115 – 170	مرتفع ↑
الغلوكوز (مغ/دل)	50 – 80	60% من قيمة البلازما	منخفض ↓
تعداد الكريات البيض	0 – 5	0 – 30	مرتفع ↑
اللمفاويات	62 – 34	20 – 18	منخفضة ↓
العدلات	2 – 5	3 – 5	مرتفعة ↑

تعداد الدم الكامل Complete Blood Count

كثرة الكريات البيض (Leukocytosis): تعداد > 10,000 — يدل عادة على عدوى أو التهاب أو ورم أرومي لمفاوي. وفي الإنتان قد يرتفع لمستويات تشبه ابيضاض الدم = تفاعل شبيه بابيضاض الدم (Leukemoid reaction).
قلة الكريات البيض (Leukopenia): تعداد < 4,000 — في العدوى الساحقة، الإيدز، التهاب الكبد الفيروسي، كثرة الوحيدات، وداء الفيالقة.
الانزياح لليسار (Left shift): ظهور العدلات غير الناضجة (خلايا عصوية Bands) في الدوران — دليل على عدوى جرثومية حادة. وظيفة العدلة الأساسية البلعمة.
ارتفاع اللمفاويات: السعال الديكي، الزهري، داء المقوسات. واللمفاويات اللانمطية ذات الهيولى الرغوية: عدوى فيروسية (CMV، كثرة الوحيدات العدوائية).
ارتفاع الوحيدات: فيروس إبشتاين-بار، السل، التهاب الشغاف الجرثومي تحت الحاد، الزهري، والريكتسيات الأوالي.
ارتفاع الحمضات: عادة أرجية، وترتفع في العدوى الطفيلية وأحيانًا الجذام والسل والفطريات الجهازية والحمى القرمزية.

فحوص أخرى Other Tests

الفحص	الدلالة
الراصّات الباردةCold agglutinins	أضداد ترصّ كريات الدم من الزمرة O في البرودة — ترتفع في *Mycoplasma pneumoniae* وكثرة الوحيدات العدوائية.
البروتين المتفاعل CC-reactive protein	بروتين سكري يُنتجه الكبد في الالتهاب الحاد ويختفي سريعًا بزواله ⇒ يدل على التهاب حالي. يدخل في تعريف NHSN لعدوى المفصل الصناعي عند CRP > 100 مغ/ل.
تحليل السوائل الجسميةBody fluid analysis	يُسحب بتقنية معقّمة، ويُفضَّل مضاد تخثّر معقّم لأن الخلايا والجراثيم قد تنحبس في الخثرة فتُعطي نتائج غير دقيقة. عمومًا: عدد كبير من الكريات البيض في أي سائل جسمي = مؤشر عدوى أو التهاب حاد.
غازات الدم الشريانيArterial blood gas	تعكس التبادل الغازي عبر الغشاء السنخي-الشعري؛ تدهورها قد يدل على فشل تنفسي بسبب التهاب رئة ⇒ مكوّن مهم في تحديد الالتهاب الرئوي المرتبط بالرعاية والمرتبط بالمنفسة.
فحوص وظائف الكبدLiver function tests	ألبومين، بيليروبين، أمونيا + إنزيمات (الفوسفاتاز القلوية، GGT، AST). تساعد في الزهري المزمن والتهاب الشغاف تحت الحاد والسل والتهابات الكبد B وC.

11) اختبار الحساسية للمضادات والمقاومة Susceptibility Testing and Resistance

الاختبار	المبدأ والقراءة
التمديد في المرقBroth dilution → MIC	معلّق جرثومي معياري في آبار تحوي تراكيز تنازلية من المضاد بوحدة ميكروغرام/مل. أول بئر لا يُظهر نموًا (عكارة) = التركيز المثبّط الأدنى MIC. تُقارن القراءة بـنقاط الفصل (Breakpoints) من CLSI لتُفسَّر: حساس / متوسط / مقاوم.
الإي-تستE-test	شريط بلاستيكي مشبّع بتمديد تسلسلي وعليه مقياس MIC، يوضع على مرج جرثومي. MIC = الرقم عند تقاطع حافة النمو مع الشريط عند الهلال. يُستخدم خصوصًا مع البنسلين والأمبيسلين والفانكومايسين، وحين تكون درجة المقاومة مهمة سريريًا (مثل البنسلين ضد S. pneumoniae).
التركيز المبيد الأدنىMBC	أقل تركيز يقتل الكائن لا يثبّط نموه فقط. نادر الإجراء.
اختبار DD test	قرص إريثرومايسين على مسافة 15–26 مم (حافة لحافة) من قرص كليندامايسين. تفلطح هالة التثبيط على شكل حرف D = مقاومة كليندامايسين مُحرَّضة (جين erm ⇒ إنزيم الميثيلاز). بدونه قد يُبلَّغ الكليندامايسين حساسًا خطأً فيفشل العلاج.
اختبار البيتالاكتامازβ-lactamase test	كشف سريع للإنزيم. يُطبَّق على: Haemophilus influenzae، Neisseria gonorrhoeae، Staphylococcus، Pseudomonas.
اختبار هودجHodge test	كشف ESBL في سالبات الغرام (Klebsiella pneumoniae، E. coli، P. aeruginosa)، ومُعدَّل لكشف الميتالو-بيتالاكتاماز والكاربابينيميز وAmpC.

ملاحظتان: اختبار الحساسية لا يُجرى روتينيًا للاهوائيات؛ واختبار الحساسية للفيروسات والفطريات يُجرى عادة في مختبرات مرجعية وغالبًا غير مقنّن.

آليات المقاومة الأربع Four Mechanisms of Resistance

تعطيل المضاد: إنتاج إنزيم مثل البيتالاكتاماز يحلّ حلقة البيتالاكتام (مثل: Staphylococcus ضد البنسلينات، P. aeruginosa ضد البنسلينات والسيفالوسبورينات والأزتريونام).
نفاذية منخفضة / نقص الالتقاط: مثل P. aeruginosa ضد الإيميبينيم.
الضخ للخارج (Efflux): طرد المضاد بعد دخوله الخلية.
تغيّر الهدف / ضعف الألفة: طفرات تغيّر بروتينات العنقوديات فلا يرتبط بها البنسلين — مثل Staphylococcus ضد الميثيسيلين وسائر البيتالاكتام، وS. pneumoniae ضد البنسلين والسيفالوسبورين.

هذه الآليات قد تكون مشفّرة في جينات الخلية نفسها أو مكتسبة بالنقل الأفقي (اقتران، تنبيغ، تحول).

12) دور المختبر في الفاشيات والفحص البيئي Laboratory Role in Outbreaks · Environmental Testing

المختبر السريري محوري في وبائيات المستوطنات والفاشيات، ويسهم بـ:

تأكيد هوية الكائنات.
التعرّف على تجمّعات (Clusters) غير معتادة.
كشف الكائنات غير المألوفة وأنماط الحساسية الشاذة.
استرجاع البيانات الأرشيفية لتحديد المعدلات الخلفية للعزل — أي الإجابة على سؤال: هل هذه فاشية فعلًا؟
حفظ العزلات من الحالات المشتبهة لاختبار ما إذا كانت الكائنات متطابقة أو مترابطة.

طرق تحديد الترابط (Typing): التنميط الحيوي (Biotyping) بأنماط التفاعلات الكيموحيوية، التنميط المصلي (Serotyping)، مخطط الحساسية (Antibiogram)، التنميط بالعاثيات (Bacteriophage typing)، تحليل البلازميدات، الرحلان الكهربائي/PFGE، وRFLP بلطخة سذرن، والطرق المضخِّمة مثل PCR. الأحدث والأدق هي الطرق الجزيئية؛ وتحليل البلازميدات محدود لأن البلازميدات قد تُفقد أو تُكتسب.

الفحص الميكروبيولوجي البيئي غير موصى به بشكل عام: مكلف، يحتاج إجراءات مخبرية خاصة، وفي معظم الحالات لا توجد معايير مرجعية للمقارنة — فينتج بيانات غير حاسمة قد تقود لقرارات خاطئة. يُجرى فقط بمبرر (تحقيق فاشية، أو التزام تنظيمي مثل مراقبة المياه). Environmental testing is not generally recommended: it is costly, may require special laboratory procedures, and in most cases no standards for comparison exist — producing inconclusive data.

يُسأل عنه في الاختبار — نقاط عالية العائد ومصائد High-Yield Points and Exam Traps

موجب الغرام = بنفسجي، سالب الغرام = وردي/أحمر. المصيدة: عكس اللونين. الخطوة الحاسمة هي غسل الكحول (المزيل للّون)، والسبب البنيوي هو سماكة الببتيدوغليكان مقابل طبقة LPS.
الاستعمار ليس عدوى. العدوى تتطلب عزل الكائن من موقع معقّم طبيعيًا أو استجابة التهابية. مزرعة بول إيجابية بلا أعراض = بيلة جرثومية عديمة الأعراض ⇒ لا تُعالَج (باستثناء الحمل وجراحة المسالك).
CoNS في مجموعة واحدة = تلوث؛ وفي مجموعات متعددة = عدوى محتملة. هذا هو السؤال المتكرر عن العنقوديات سالبة التخثّر.
حجم الدم هو العامل الأهم لحساسية زرع الدم — و4 قوارير × 10 مل = مجموعتان للتقييم الأولي، من موقعين محيطيين منفصلين.
البوفيدون-أيودين المائي وحده مطهر أضعف لسحب مزارع الدم مقارنة بالمستحضرات الكحولية.
لا تُزرع أطراف القساطر روتينيًا — فقط عند الاشتباه بعدوى مرتبطة بالقسطرة.
المزارع قبل المضادات الحيوية. العينة بعد بدء العلاج ⇒ سلبية كاذبة. وكذلك الحجم غير الكافي.
بلغم بكثرة الخلايا الظهارية الحرشفية ⇒ عينة لعابية تُرفض ويُطلب بديلها.
Ziehl-Neelsen يستخدم الحرارة، وKinyoun بارد. مصيدة صبغات متكررة.
Chlamydia · Rickettsia · Mycobacterium · Nocardia تُصبغ بضعف بالغرام. وMycoplasma بلا جدار خلوي.
فحص المسح: حساسية عالية، نوعية منخفضة ⇒ يحتاج تأكيدًا. فحص التأكيد: نوعية عالية. والـ RPR مثالها الكلاسيكي مع إيجابياته الكاذبة (الحمل، الرثوي، السل، التهاب الكبد…).
مقام الحساسية هو TP+FN، ومقام النوعية هو TN+FP. الخلط بينهما أشيع خطأ حسابي.
الدقة بلا صحة = خطأ متكرر بثبات. واختبار الكفاءة تقييم خارجي لا داخلي.
الفحوص الجزيئية معرّضة للإيجابيات الكاذبة من التلوث؛ وتضخيم الإشارة هو الأقل عرضة لذلك لأنه لا يزيد كمية الهدف.
المسابر غير المضخَّمة ضعيفة الحساسية — أشيع استخدام لها: تأكيد المتفطرات بطيئة النمو والفطريات ثنائية الشكل.
الفحص البيئي غير موصى به روتينيًا — لعدم وجود معايير مقارنة.
MIC = أول بئر بلا نمو، ويُفسَّر بنقاط فصل CLSI لا برقم مطلق.
اختبار D يكشف مقاومة الكليندامايسين المُحرَّضة في العنقوديات — وإغفاله يؤدي لعلاج فاشل.
الانزياح لليسار (Bands) ⇒ عدوى جرثومية حادة؛ اللمفاويات اللانمطية ⇒ فيروسية؛ الحمضات ⇒ طفيلية.
السائل الدماغي الشوكي الجرثومي: عكِر، بروتين مرتفع، غلوكوز منخفض، عدلات مرتفعة. والمصيدة: اتجاه الغلوكوز.
الأبواغ (C. difficile) لا يقتلها الكحول — لأنها تتحمل الحرارة فوق الغليان والجفاف والكيماويات.
اللاهوائي الاختياري ينمو بوجود الأكسجين وبغيابه؛ والمحب للأكسجين القليل يحتاج 2–10% فقط.
أغار الشوكولاتة = إثرائي للنيسريات، وكبريتيت البزموت = انتقائي للسالمونيلا. لا تخلط بين الانتقائي والتفريقي.
دور المختبر في الفاشية: تأكيد الهوية + كشف التجمّعات + المعدل الخلفي من الأرشيف + حفظ العزلات للتنميط.
عنون العينة بالموقع التشريحي الدقيق — لأن المختبر يختار الوسط وطريقة المعالجة بناءً عليه.

مصطلحات وأرقام للحفظ Terms and Numbers to Memorize

عربي	English	النقطة المفتاحية
الاستعمار	Colonization	وجود بلا أعراض وبلا غزو نسيجي
العدوى	Infection	وجود + غزو؛ موقع معقّم أو استجابة التهابية
التلوث	Contamination	دخول أثناء الجمع/النقل؛ سبب رفض العينة
الفلورا الطبيعية / المتعايشات	Normal flora / Common commensals	تختلف حسب موقع الجسم
العدوى الانتهازية	Opportunistic infection	C. neoformans, Legionella عند ناقصي المناعة
خارجي / داخلي المنشأ	Exogenous / Endogenous	من خارج المضيف / من فلورا المضيف
بدائية النواة	Prokaryotic	بلا نواة مرئية ولا عضيات غشائية
الببتيدوغليكان	Peptidoglycan	سميك في موجب الغرام
عديد السكاريد الدهني	Lipopolysaccharide (LPS)	في جدار سالب الغرام؛ يفككه الكحول
السفرانين	Safranin	الصبغة المضادة الحمراء
البوغ الداخلي	Endospore	Clostridium, Bacillus؛ يقاوم فوق الغليان
الانقسام الثنائي	Binary fission	~30 دقيقة للجيل
الاقتران / التنبيغ / التحول	Conjugation / Transduction / Transformation	ثلاث طرق النقل الأفقي للجينات
لاهوائي إجباري	Obligate anaerobe	يُقتل أو يُثبَّط بالأكسجين
لاهوائي اختياري	Facultative anaerobe	ينمو مع الأكسجين وبدونه
محب للأكسجين القليل	Microaerophilic	2–10% O₂
حرارة الحضن المعتادة	Incubation temperature	35°C
وسط إثرائي / انتقائي / تفريقي	Enrichment / Selective / Differential	شوكولاتة / كبريتيت البزموت / أسيتات
مزارع الدم للتقييم الأولي	Initial blood cultures	4 × 10 mL = 2 sets
كلفة مزرعة دم ملوثة	Cost of one contaminated culture	1–5.4 يوم · $4,385–$10,078
الحساسية	Sensitivity	TP ÷ (TP + FN)
النوعية	Specificity	TN ÷ (TN + FP)
الدقة/التكرارية	Precision	تكرار النتيجة نفسها
اختبار الكفاءة	Proficiency testing	تقييم خارجي بعينات عمياء
بروتين السائل الدماغي الشوكي (بالغ)	CSF protein (adult)	15–45 mg/dL
غلوكوز السائل الدماغي الشوكي (بالغ)	CSF glucose (adult)	50–80 mg/dL
كريات بيض السائل الدماغي الشوكي (بالغ)	CSF WBC (adult)	0–5
كثرة/قلة الكريات البيض	Leukocytosis / Leukopenia	>10,000 · <4,000
البروتين المتفاعل C في عدوى المفصل الصناعي	CRP in NHSN PJI	>100 mg/L
هيدروكسيد البوتاسيوم للتحضير الرطب	KOH wet mount	10%
التركيز المثبّط الأدنى	Minimum Inhibitory Concentration (MIC)	أول بئر بلا نمو؛ µg/mL؛ نقاط فصل CLSI
مسافة اختبار D	D test disk distance	15–26 mm
وسط الزرع العام	Blood agar	5% دم أغنام

فيديوهات شرح Video Explanations

الاختبار — 50 سؤالًا Quiz — 50 Questions

أجب على الأسئلة الخمسين كاملة ثم اضغط «إنهاء الاختبار» — التصحيح والتبريرات تظهر بعد الإنهاء فقط. Answer all 50 questions, then press Finish. Scoring and rationales appear only after you finish.